高产β-环糊精葡萄糖基转移酶菌株的筛选、产酶条件优化及酶学性质研究

采用透明圈法从酱醪中筛选高产β-环糊精葡萄糖基转移酶(β-CGTase)菌株,通过形态观察及分子生物学技术对其进行菌种鉴定,采用单因素及响应面试验对该菌的产酶培条件进行优化,分析发酵温度及时间对产酶的影响,并对该菌所产的β-CGTase酶学性质进行研究.结果表明,从酱醪中筛选得到一株高产β-CGTase的菌株D5,被鉴定为米曲霉(Aspergillusoryzae),其产β-CGTase的最佳培养基组成为淀粉2.5％、酵母膏1.85％、Na2CO30.35％、K2HPO40.02％、MgSO4.7H2O 0.02％,最佳发酵温度为30℃,发酵时间为72h,在此最优发酵条件下,β-CGTase活力为3 208.01 U/mL.β-CGTase的最适反应温度为50℃、最适反应pH值为8.5,除Ca2+外,Mn2+、Fe2+、Cu2+、Zn2+对该酶的活力有抑制作用,其抑制程度的大小为Zn2+＞Mn2+＞Cu2+＞Fe2+.