斑翅果蝇Yolk Protein 1基因原核表达及抗体制备

斑翅果蝇(Drosophila suzukii)是一种农业害虫,在世界范围内分布广泛,可对多种水果产生不可逆损害,造成巨大经济损失.本试验对斑翅果蝇Yolk Protein 1(Ds-YP1)基因进行原核表达,并对Ds-YP1蛋白的功能结构域和信号肽进行预测,克隆多肽并构建pET-32a-c(+)-Ds-YP1原核表达载体,IPTG诱导表达并免疫小鼠制备抗体;用成功制备的抗体进行斑翅果蝇蛋白Western Blot验证.结果表明构建的pET-32a-c(+)-Ds-YP1表达载体在大肠杆菌中表达了His-Ds-YP1融合蛋白,通过免疫小鼠成功制备并纯化了Ds-YP1多克隆抗体.制备的Ds-YP1多克隆抗体不但能识别His-Ds-YP1融合蛋白,而且能识别斑翅果蝇Ds-YP1蛋白,具有较好的特异性.本研究成功制备了斑翅果蝇Ds-YP1的多克隆抗体,对进一步研究Yolk Protein蛋白作用机制具有重要意义.