地塞米松联合归脾汤通过调控巨噬细胞极化平衡缓解免疫性血小板减少症

目的:探讨归脾汤通过抑制核因子κB(NF-κB)通路调控单核巨噬细胞极化平衡而缓解气虚型原发性免疫性血小板减少症(ITP)的作用及机制.方法:收集64例初诊原发性ITP患者,随机分成两组各32例:地塞米松(Dex)治疗组和Dex+归脾汤联合治疗组;另选择同期健康者30例为对照组.采用血细胞分析仪检测初诊ITP组、Dex治疗组和Dex+归脾汤联合治疗组的血小板数量.收集治疗前后各组血清,使用ELISA检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)和5-羟色胺(5-HT)的表达.磁珠分选各组外周血单个核细胞,体外培养后用佛波酯诱导为M0型巨噬细胞,并分别用脂多糖(LPS)+IFN-γ或白细胞介素4(IL-4)诱导;利用流式细胞术检测各组细胞的M1型指标CD80或M2型指标CD206;使用ELISA检测各组细胞上清中IL-12和IL-10的表达.采用Western blot法检测NF-κB通路相关蛋白p65、p-p65及吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)蛋白水平.结果:与初诊ITP组比较,两组治疗均能够升高血小板数量(P<0.05),而与Dex治疗相比,Dex+归脾汤联合治疗效果更为显著(P<0.05).Dex+归脾汤联合治疗能更显著降低血清TNF-α和IFN-γ水平及细胞p-p65和IDO蛋白水平,同时升高血清5-HT水平(P<0.05).巨噬细胞诱导实验显示,Dex+归脾汤联合治疗更易促进M2型极化指标CD206和IL-10的上调,同时抑制M1型极化指标CD80和IL-12的下调(P<0.05).结论:归脾汤可能通过抑制NF-κB p65磷酸化和IDO表达,促进M2型巨噬细胞的极化,从而对气虚型ITP达到较好的治疗效果.