箭叶淫羊藿中具有HDAC抑制活性的化学成分研究

组蛋白去乙酰化酶(HDACs)异常活化和肿瘤发生、组织发育异常密切相关.已有选择性HDAC抑制剂(HDACi)应用于临床.本实验采用HDACi筛选试剂盒进行活性追踪,从健骨中药箭叶淫羊藿70％醇提取物中分离得到了11个化合物.经质谱和核磁共振波谱分析,化合物鉴定为槲皮素(1)、牡荆苷(2)、山奈酚-3-O-a-L-阿拉伯吡喃糖苷(3)、山奈酚-3-O-β-D-木吡喃糖苷(4)、山奈酚-3-O-β-D-葡萄吡喃糖苷(5)、山奈酚-3-O-(6''-O-乙酰)-β-D-葡萄吡喃糖苷(6)、山奈酚-3-O-(6''-O-(E)-对-香豆酰基)-β-D-葡萄毗喃糖苷(7)、山奈酚-3-O-(2",4"-双-O-(E)-对-香豆酰基)β-D-葡萄吡喃糖苷(8)、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄吡喃糖苷(9)、异鼠李素-3-O-β-D-木吡喃糖苷(10)和schizandri-side(11).化合物2～11系首次从该种植物中分得.化合物1～ 10都显示了强于淫羊藿苷的HDAC抑制活性;化合物3、4和5显示了强于山奈酚的HDAC抑制活性.采用蛋白印迹法进一步观察了非毒性浓度的3、4和5对宫颈癌HeLa细胞内HDAC1～11表达的影响.结果 发现:三个化合物都能明显抑制HDAC6(抑制成骨)的表达,4同时还明显下调HDAC4/7(抑制成骨)的表达.本实验首次从箭叶淫羊藿鉴定了具有HDAC抑制作用的活性成分:无异戊烯取代的黄酮苷,特别是山奈酚-3-O-单糖苷(3～5);化合物3～5对HDAC6或HDAC4/7蛋白表达的抑制作用,为将其识别为淫羊藿药材中潜在的具有山奈酚-3-O-单糖苷结构特征的抗骨质疏松症有效成分,提供了实验依据.