LEF1及CTNNB1对食管癌细胞周期阻滞和细胞凋亡及放射抵抗影响

目的:探究分析淋巴细胞结合增强因子(LEF1)和钙黏蛋白相关蛋白(CTNNB1)表达水平与食管癌细胞周期阻滞、细胞凋亡、放射抵抗的关系及相关作用机制。方法:构建LEF1、CTNNB1重组表达质粒和空载质粒，分别转染食管癌细胞，采用RT-PCR实验检测质粒转染效率；分别采用克隆形成实验、CCK8实验、流式细胞周期实验、流式细胞凋亡实验、Western Blot实验检测转染前后食管癌细胞放射抵抗能力、增殖能力、细胞周期变化、细胞凋亡能力的差异。结果:pGEX-LEF1+pCMV6-CTNNB1组(下称实验组)食管癌细胞克隆集落细胞存活率明显优于其他各组( P<0.05)；实验组细胞在72 h、96 h、120 h时增殖能力明显优于pGEX+pCMV6组、pGEX-LEF1+pCMV6组及pCMV6-CTNNB1+pGEX组细胞( P<0.05)；实验组细胞中发生G 2期阻滞细胞占比明显优于其他各组( P<0.05)；实验组食管癌细胞凋亡比例明显低于pGEX+pCMV6组、pGEX-LEF1+pCMV6组及pCMV6-CTNNB1+pGEX组水平( P<0.05)；实验组食管癌细胞中Bax、Caspase3蛋白表达水平明显低于pGEX+pCMV6组、pGEX-LEF1+pCMV6组及pCMV6-CTNNB1+pGEX组水平( P<0.05)，实验组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显优于其他各组细胞( P<0.05)。 结论:LEF1、CTNNB1可通过介导Wnt信号通路，调控放射后食管癌细胞的增殖和G 2期细胞阻滞，通过减少细胞凋亡，提高细胞的放射抵抗能力。