恶性黑色素瘤组织AURKA表达对细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨极光激酶A(AURKA)在恶性黑色素瘤组织中的表达以及对黑色素瘤细胞增殖、凋亡以及迁移的影响.方法 收集2018-01-01-2021-01-01在宁夏医科大学总医院病理科储存的30例原位及转移性黑色素瘤组织,免疫组织化学法检测AURKA在正常皮肤组织、原位以及转移性黑色素瘤组织中的表达水平.分别选用来源于同一患者的原位黑色素瘤细胞WM115及转移性黑色素瘤细胞WM266-4,通过小干扰RNA(siRNA)干扰AURKA表达,将细胞分为阴性对照组(si-NC)和AURKA干扰组(si-AURKA#1、si-AURKA#2和si-AURKA#3).进一步应用CCK8、划痕以及侵袭实验检测AURKA敲低后对细胞增殖、迁移和侵袭的影响,同时流式细胞术检测其对2种细胞凋亡和周期的影响.采用单因素方差分析法比较各组间差异,2组间比较采用t检验.结果 AURKA在皮肤恶性黑色素瘤组织中呈现高表达.转染si-AURKA后WM115细胞si-NC、si-AURKA#1、si-AURKA#2、si-AURKA#3各组AURKA蛋白相对表达量分别为0.911±0.031、0.515±0.117、0.575±0.095和0.512±0.059,差异有统计学意义,F=16.09,P<0.01;WM266-4细胞si-NC、si-AURKA#1、si-AURKA#2、si-AURKA#3各组AURKA蛋白相对表达量分别为0.912±0.071、0.481±0.077、0.494±0.077和0.456±0.097,差异有统计学意义,F=31.19,P<0.01;其中转染si-AURKA#3组WM115以及WM266-4细胞AURKA的表达较si-NC组均降低,差异有统计学意义,均P<0.01.CCK8结果表明,敲低AURKA基因明显抑制了原位与转移性黑色素瘤细胞的增殖,差异有统计学意义,FWM115=24.88,PWM115<0.05;FWM266-4=83.12,PWM266-4<0.01.划痕实验表明,si-AURKA组划痕愈合率小于si-NC和Control组,差异有统计学意义,FWM115=37.99,PWM115<0.001;FWM266-4=26.24,PWM266-4<0.05.侵袭实验表明,si-AURKA处理后WM115、WM266-4细胞侵袭数明显少于si-NC和Control组,差异有统计学意义,FWM115=16.20,PWM115<0.01;FWM266-4=6.97,PWM266-4<0.05.细胞凋亡结果表明,WM115以及WM266-4细胞凋亡率si-AURKA组较Control和si-NC组明显增多,差异有统计学意义,FWM115=117.30,FWM266-4=37.77,均P<0.01.细胞周期实验检测表明,si-AURKA处理之后WM115、WM266-4细胞G2/M期的细胞百分比较Control和si-NC组增多,差异有统计学意义,FWM115=718.60,FWM266-4=19.78,均P<0.01.结论 AURKA在恶性黑色素瘤组织中高表达,敲低AURKA表达明显抑制原位以及转移性黑色素瘤细胞的增殖和迁移并阻滞细胞周期,提示其可能作为潜在评估指标,参与黑色素瘤的发生发展和转移.