补肾调经方对体外培养氧化应激模型小鼠卵母细胞质量及抗氧化能力的影响

目的 通过体外添加H2 O2建立氧化应激模型,探讨补肾调经方对小鼠卵母细胞质量及抗氧化能力的影响.方法 选用D24-26健康雌性昆明小鼠,每只小鼠注射血促性素(10 IU)48 h后,体式显微镜下分离卵巢,获取GV期卵母细胞,将细胞随机分为正常组、模型组、补肾调经方高剂量组、补肾调经方低剂量组,置于体外成熟卵母细胞(IVM)培养液中培养14 h.收集MⅡ期卵母细胞,在倒置显微镜下观察卵母细胞第一极体(first polar body,PB1)排出情况,透射电镜观察线粒体超微结构,Mito-Tracker Red CMXRos与DCHF-DA试剂盒检测线粒体分布及活性氧(ROS)水平,化学比色法与RT-qPCR法检测超氧化物歧化酶(SOD)与谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及mRNA表达.结果 与正常组比较,模型组卵母细胞PB1排出率降低,线粒体结构完整性被破坏、分布异常及ROS水平升高,抗氧化酶SOD、GSH-Px活性及mRNA表达均降低;与模型组比较,补肾调经方高、低剂量组线粒体结构较完整,仅有部分线粒体嵴断裂,线粒体呈均匀分布,ROS水平降低,PB1排出率、抗氧化酶SOD、GSH-Px活性及mRNA表达均升高(P<0.05).结论 补肾调经方可提高卵母细胞质量,其机制可能与保护线粒体结构和功能、调节抗氧化酶活性、降低氧化损伤有关.