四君子汤对IEC-6细胞增殖相关指标及大鼠胃肠黏膜c-Myc表达的影响

目的 观察四君子汤对IEC-6细胞(大鼠小肠上皮细胞)增殖,多胺调控生长相关基因细胞周期检测点激酶2 (Checkpoint kinase 2,Chk2)、c-Myc表达,以及对大鼠胃肠黏膜c-Myc蛋白表达的影响.方法 采用SD大鼠制备空白血清及四君子汤含药血清;无负荷细胞实验设空白对照组、腐胺组(10 μmol·L-1)及四君子汤含药血清低、中、高(5％、10％、20％)剂量组;α-二氟甲基鸟氨酸(α-difluoromethylomithine,DFMO)负荷细胞实验设空白对照组、DFMO组(2.5 mmol·L-1)、腐胺组(10 μmol·L-1)及四君子汤含药血清低、中、高(5％、10％、20％)剂量组;动物实验将SD大鼠随机分为空白对照组、模型组(吲哚美辛组)及四君子汤低、高(5、15 g·kg-1)剂量组.采用MTT法检测IEC-6细胞增殖情况;qPCR法检测细胞Chk2、c-Myc mRNA表达;Western Blot法检测细胞Chk2、p-Chk2、c-Myc蛋白表达和大鼠胃肠黏膜的c-Myc蛋白表达.结果 ①细胞实验:与空白对照组比较,10％、20％四君子汤含药血清可促进给药24 h后IEC-6细胞的增殖(P＜0.01),提高p-Chk2蛋白及c-Myc mRNA/蛋白表达水平(P＜ 0.05,P＜0.01);5％、10％、20％四君子汤含药血清可促进给药48、72 h后细胞增殖(P＜0.01),促进Chk2 mRNA/蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01).与DFMO组比较,5％、10％、20％四君子汤含药血清可促进给药48 h后细胞增殖(P＜0.01),提高c-Myc mRNM蛋白表达(P＜ 0.05,P＜0.01);10％、20％四君子汤含药血清可促进给药72 h后细胞增殖(P＜0.01),促进Chk2及p-Chk2蛋白表达(P＜ 0.05,P＜0.01);20％四君子汤含药血清可促进Chk2 mRNA表达(P＜0.05).②动物实验:与模型组比较,四君子汤5、15 g·kg-1可上调模型大鼠胃黏膜及小肠黏膜c-Myc蛋白表达(P＜ 0.05,P＜0.01).结论 四君子汤可促进IEC-6细胞增殖,其作用机制可能与影响多胺信号通路,上调生长相关基因Chk2、c-Myc表达有关.四君子汤可提高胃肠黏膜损伤模型大鼠胃及小肠黏膜c-Myc蛋白表达水平.