洗心汤组分配伍对D-半乳糖联合Aβ25-35致AD模型大鼠学习记忆能力的影响及主要机制探讨

目的 观察洗心汤及其重要单体成分对于复合型痴呆模型大鼠学习记忆能力、脑内Aβ沉积的影响,通过检测各组大鼠海马组织PI3K/Akt信号通路相关蛋白的表达,初步探讨洗心汤及其重要单体从神经细胞凋亡途径改善AD的可能机制.方法 将84只健康SD大鼠随机分为假手术组、模型组、多奈哌齐组、洗心汤全方组、组分配伍低剂量组、组分配伍中剂量组、组分配伍高剂量组,每组12只.采用腹腔注射D-半乳糖和双侧脑室注射Aβ25-35致复合型痴呆大鼠模型,连续灌胃治疗4周后进行相关指标检测.Morris水迷宫检测各组大鼠空间学习记忆能力;HE染色观察海马CA1区病理学改变;免疫组化法观测海马区Aβ1-42聚集情况;蛋白免疫印迹法检测海马组织中Akt、p-Akt、Bcl-2和Bax蛋白表达情况.结果 与假手术组相比,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长,总游泳距离、目标平台象限滞留时间和有效区域进入次数都显著下降(P＜0.05、P＜0.01).与模型组比较,洗心汤全方组及组分配伍各组逃避潜伏期均显著缩短(P＜0.05、P＜0.01),有效区域进入次数均显著增加(P＜0.05、P＜0.01);洗心汤全方组和组分配伍中剂量组总游泳距离、目标平台象限滞留时间均明显上升(P＜0.05、P＜0.01).HE染色结果显示,各治疗组海马CA1区神经细胞病理改变较模型组有明显改善.免疫组化结果显示,洗心汤全方组和组分配伍各组海马区Aβ1-42沉积情况较模型组有明显减少(P＜0.01).Western blot结果显示,洗心汤全方组能显著提高p-Akt、Bcl-2蛋白表达及p-Akt/Akt、Bcl-2/Bax比值(P＜0.01),减弱Bax蛋白表达(P＜0.01).组分配伍各组p-Akt蛋白表达及p-Akt/Akt比值均不同程度增加.组分配伍低剂量组Bcl-2、Bax蛋白表达明显优于中、高剂量组.结论 洗心汤及其重要单体组分配伍均可不同程度改善AD模型大鼠学习记忆能力,其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路,抑制神经元凋亡,调节神经元自噬,抑制脑内Aβ聚集有关.由于中药复方单体成分的复杂性,关于洗心汤中有效成分的确切作用机制仍需要进一步深入探讨.