RasGRF1在结直肠癌细胞中的表达及其对癌细胞生物学行为的影响

目的 探究RasGRF1在结直肠癌细胞中的表达及对癌细胞生物学功能的影响.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测不同结直肠癌细胞系DiFi、SNU175、HT-29、HCT-15细胞中RasGRF1 mRNA;体外培养人结肠癌细胞,随机分为si-RasGRF1-NC组(阴性对照)、si-RasGRF1组(沉默RasGRF1表达)、NG组(空白对照).采用qRT-PCR检测各组RasGRF1 mRNA,CCK-8法检测细胞存活情况,AnnexinV/PITC双染法检测细胞凋亡,Western blotting检测细胞PI3K/Akt通路蛋白.结果 DiFi细胞中RasGRF1 mRNA相对表达量最高(P<0.05),选择DiFi细胞进行后续实验.si-RasGRF1组光密度值低于NG组、si-RasGRF1-NC组(P<0.05).si-RasGRF1组细胞凋亡率高于NG组和si-RasGRF1-NC组(P<0.05).si-RasGRF1组p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白相对表达量低于NG组和si-RasGRF1-NC组(P<0.05),Caspase-3蛋白相对表达量高于NG组和si-Ras-GRF1-NC组(P<0.05).结论 RasGRF1在结直肠癌细胞中异常高表达,抑制RasGRF1表达可抑制DiFi细胞增殖并诱导细胞凋亡,且该作用是通过抑制DiFi细胞PI3K/Akt通路活化来实现的.