黄芪甲苷配伍阿魏酸对顺铂诱导损伤的骨髓间充质干细胞的保护作用

目的 研究黄芪甲苷Ⅳ(Astragaloside Ⅳ,As-Ⅳ)配伍阿魏酸(Ferulic Acid,FA)对顺铂(Csplatin,DDP)诱导损伤的大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的保护作用及其分子机制.方法 SD大鼠BMSCs的分离及培养;通过流式细胞术鉴定BMSCs表面标志物CD34、CD45、CD105、CD44;通过Cell Counting Kit-8试剂盒(CCK8)探究黄芪甲苷、阿魏酸及其配伍对BMSCs增殖的效应以及DDP对BMSCs凋亡的影响;通过CCK8法探究黄芪甲苷配伍阿魏酸对顺铂杀伤BMSCs的保护作用;通过ALP染色法探究黄芪甲苷配伍阿魏酸对顺铂杀伤BMSCs后成骨分化的保护效应;通过real-time PCR检测黄芪甲苷配伍阿魏酸干预DDP杀伤后BMSCs后SCF、SDF1和凋亡相关基因BCL2、Caspase3以及PI3K-AKT通路的mRNA表达量;通过Western Blot检测凋亡相关基因BCL2、Caspase3以及PI3K-AKT通路的蛋白相对表达量.结果 流式细胞术结果显示,CD105、CD45阳性率在98％以上且CD34、CD44阴性率小于2％,证明所取细胞是BMSCs.CCK8结果显示As-Ⅳ和FA及其配伍可促进BMSCs的增殖,且可以保护因顺铂诱导损伤的BMSCs.Real-time PCR和Western Blot结果显示黄芪甲苷配伍阿魏酸可通过影响SCF、SDF1、BCL2、Caspase3以及PI3K-AKT的表达从而发挥作用.结论 黄芪甲苷、阿魏酸及其配伍均可促进BMSCs的增殖,且可以保护顺铂诱导损伤后的BSMCs,其作用机制可能调控BMSCs SCF、SDF1的分泌、干预凋亡基因BCL2、Caspase3以及调控PI3K-AKT信号通路的表达有关.