浙贝母灰霉病病原真菌的分子鉴定

为了鉴定引起浙贝母Fritillaria thunbergii Miq.灰霉病的病原真菌,于2015年-2019年收集浙贝母灰霉病样品,采用常规组织分离法在PDA培养基上分离纯化获得10株葡萄孢属Botrytis真菌.进一步以内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)、RNA 聚合酶亚基 Ⅱ(the second largest subunit of the nuclear RNA polymerase enzyme Ⅱ,RPB2)、热激蛋白60(heat shock protein 60,HSP60)和甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde 3-phos-phate dehydrogenase,G3PDH)为DNA条形码,用特异性引物进行PCR扩增并测序,运用CodonCode Aligner拼接序列及BLAST分析,这10个菌株序列相同,为同一菌株,在GenBank中进行同源性比对,用MEGA 10.1构建系统发育树,确定此菌株与灰葡萄孢Botrytis cinerea相应序列的一致性为100％.盆栽接种法检测表明此菌株可引起浙贝母灰霉病.据此认为浙贝母灰霉病的病原真菌是灰葡萄孢而非普遍认为的椭圆葡萄孢Botrytis elliptica.