杉木ClWRKY44基因克隆及其表达特性分析

[目的]以杉木幼叶为试验材料,通过克隆杉木ClWRKY44基因,分析其表达特性,为揭示杉木抗逆生理的分子机制提供理论依据.[方法]采用RT-PCR技术克隆杉木ClWRKY44基因,对其进行生物信息学分析和亚细胞定位研究,并利用实时荧光定量PCR技术分析其表达情况.[结果]杉木ClWRKY44基因的开放阅读框(ORF)为1 776bp,编码591个氨基酸,具有WRKY结构域.系统进化树分析结果显示ClWRKY44基因与拟南芥(Arabidopsis thaliana)ATWRKY44的亲缘关系较密切,其在杉木的不同器官(叶、根、茎)中均有表达,嫩叶中的表达量最高,茎中次之,根中最低.低温胁迫处理6h,ClWRKY44基因相对表达量最高,约是对照组的79.8倍.干旱胁迫处理24h,ClWRKY44基因在高浓度干旱胁迫处理下的相对表达量最高,约是对照组的46.6倍.[结论]杉木ClWRKY44基因编码的蛋白质序列与拟南芥ATWRKY44的同源性很高,在调控植物逆境胁迫应答过程中可以发挥功能,为杉木幼苗生长发育的适应性提供参考.