雌性牦牛主要生殖器官中DBI的表达与定位分析

为加深对DBI基因功能的探究,揭示其在牦牛生殖生理过程中的作用.本试验采集健康母牦牛(3～6岁)繁殖周期不同阶段(卵泡期、黄体期和妊娠期)的卵巢、输卵管和子宫组织,共分为9组,每组设置3个生物学重复.采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)和蛋白免疫印迹技术(Western blotting,WB)检测牦牛DBI在繁殖周期不同阶段雌性牦牛生殖器官中的相对表达量;通过免疫组织化学方法(immunohistochemistry,IHC)定位DBI蛋白在雌性牦牛卵巢、输卵管和子宫中的分布情况.结果 表明:1)qRT-PCR结果显示,在卵巢中,DBI在黄体期和妊娠期的表达量显著高于卵泡期(P＜0.05);在输卵管中,DBI在黄体期表达量显著高于卵泡期和妊娠期(P＜0.05);在子宫中,DBI在妊娠期表达量最高,黄体期次之,卵泡期最低.2)Western blotting结果表明,在卵巢中,DBI在妊娠期的水平显著高于卵泡期和黄体期(P＜0.05);在输卵管中,DBI在黄体期水平显著高于卵泡期和妊娠期(P＜0.05);在子宫中,DBI在妊娠期水平明显高于黄体期和卵泡期(P＜0.05).3)IHC结果显示,DBI主要位于生殖上皮细胞、颗粒细胞、卵泡膜细胞、黄体细胞、输卵管上皮细胞、子宫基质细胞和子宫腺中.DBI在牦牛繁殖周期不同阶段的卵巢、输卵管和子宫组织中的表达量存在显著差异,说明其参与牦牛生殖生理调控,为进一步挖掘DBI基因在高原哺乳动物生殖方面的研究奠定相应的理论基础.