马铃薯羧肽酶抑制剂与Cry1Ac毒素混用对棉铃虫中肠蛋白酶活性及杀虫活性的影响

为研发转多价抗虫棉,利用蛋白酶专性底物测定马铃薯羧肽酶抑制剂(potato carboxypepti-dases inhibitor,PCI)和Cry1Ac毒素单用及混用后棉铃虫Helicoverpa armigera幼虫中肠内总蛋白酶、类胰蛋白酶、类胰凝乳蛋白酶和羧肽酶的活性、羧肽酶A (carboxypeptidase A,CPA)和羧肽酶B(carboxypeptidase B,CPB)基因的相对表达量及对棉铃虫的杀虫活性.结果 表明,饲喂20μg/cm2 PCI+1 μg/cm2 Cry1Ac、40 μg/cm2 PCI+5 μg/cm2 Cry1Ac含药饲料后,棉铃虫3龄幼虫中肠内CPA活性分别为0.20 U/mg和0.16 U/mg,显著低于对照;总蛋白酶活性均为0.150D·min-1·mg-1,与对照差异不显著;类胰蛋白酶活性均为0.45 μmol·min-1·mg-1,均显著低于其他处理,CPB基因表达量较对照显著下调.饲喂20 μg/cm2 PCI、40 μg/cm2 PCI、1μg/cm2 Cry1Ac、5 μg/cm2 Cry1Ac、20 μg/cm2 PCI+1 μg/cm2 Cry1Ac、40 μg/cm2 PCI+5 μg/cm2 Cry1Ac含药饲料后,CPB活性分别为0.26、0.26、0.24、0.26、0.27和0.26 U/mg,与对照差异不显著;棉铃虫3龄幼虫中肠内类胰凝乳蛋白酶活性分别为0.48、0.39、0.42、0.41、0.40和0.45 μmol·min-1·mg-1,6者之间差异不显著,但均显著低于对照;棉铃虫3龄幼虫中肠内CPA基因表达量均较对照显著上调.饲喂20 μg/cm2 PCI+0.02 μg/cm2 Cry1Ac、40 μg/cm2 PCI+0.02 μg/cm2 Cry1Ac、20 μg/cm2 PCI +0.06 μg/cm2 Cry1Ac、40 μg/cm2 PCI+0.06 μg/cm2 Cry1Ac含药饲料后,棉铃虫初孵幼虫实际校正死亡率分别为66.54％、68.28％、77.74％和85.76％,均高于其预期校正死亡率,表明PCI和Cry1Ac两者对杀虫活性表现为独立作用和增效作用,两者可共同用于棉铃虫幼虫的防治.