苏云金芽孢杆菌的分离鉴定及伴孢晶体蛋白生物毒力效果分析

为发掘苏云金芽孢杆菌伴孢晶体蛋白对烟草甲幼虫生物毒力活性.以复烤片烟云烟87为供试材料,通过醋酸钠+抗生素的方法从烟叶表面分离菌株,采用生理生化指标对比和16S rDNA测序鉴定出苏云金芽孢杆菌.确定了其伴孢晶体的形态和基因型,考察了Bt菌株生长周期,分析了伴孢晶体蛋白并对烟草甲幼虫的毒力活性.结果表明:①分离得到的Bt菌株能产生菱形的cry1型和球形的cry8型伴孢晶体蛋白,其伴孢晶体蛋白对3～4周龄的烟草甲幼虫有很高的毒力活性.②分别使用不同浓度晶体蛋白处理后的烟叶感染烟草甲幼虫,1 d后幼虫出现死亡现象,形态变为黑褐色,生物毒力分别随感染时间和蛋白浓度梯度的增加而逐步提高.③感染4 d后150,10 mg/L的死亡率分别达(96.67±4.22)％,(51.11±5.02)％.结果不仅表明分离得到的苏云金芽孢杆菌伴孢晶体蛋白对烟草甲幼虫具有较强的生物毒性,且为进一步利用生物性技术防治烟叶仓储害虫提供理论参考.