β-羟丁酸抑制脂多糖诱导奶牛中性粒细胞核因子-κB信号通路的激活

高酮血症造成奶牛中性粒细胞先天免疫机能受到抑制,本研究探讨 β-羟丁酸(BHBA)是否抑制脂多糖(LPS)诱导的奶牛中性粒细胞核因子-κB(NF?κB)信号通路的激活.分离健康奶牛中性粒细胞,采用LPS(100 ng/mL)和不同浓度(0.5、1.0、2.0和4.0 mmol/L)BHBA作用于中性粒细胞,收集细胞,应用实时荧光定量PCR(qRT?PCR)检测中性粒细胞中白细胞介素-1β(IL?1β)、白细胞介素-6(IL?6)、肿瘤坏死因子-α(TNF?α)和NF?κBp65 mRNA表达水平,Western blot检测NF?κBp65蛋白表达水平,比色法检测核因子-κB抑制物激酶 β(IKKβ)激酶活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测促炎细胞因子TNF?α、IL?6和IL?1β的分泌量.结果表明:与对照组(不进行BHBA和LPS处理)相比较,LPS组(单独LPS处理)中IL?1β、IL?6、TNF?α和NF?κBp65 mRNA表达水平和NF?κBp65蛋白表达水平极显著增加(P<0.01),IKKβ激酶活性极显著增强(P<0.01),IL?1β和TNF?α的分泌量极显著增加(P<0.01),IL?6的分泌量显著增加(P<0.05).与LPS组相比,0.5、1.0、2.0和4.0 mmol/L BHBA均使IL?1β、IL?6、TNF?α和NF?κBp65 mRNA表达水平和NF?κBp65蛋白表达水平显著或极显著增加(P<0.05或P<0.01),IKKβ 激酶活性显著或极显著增强(P<0.05或P<0.01),IL?1β、IL?6和TNF?α的分泌量显著或极显著增加(P<0.05或P<0.01).以上结果表明,高浓度BHBA可以抑制LPS诱导的奶牛中性粒细胞NF?κB信号通路的激活,具有一定的抗炎功能.