MiR-155对小儿急性淋巴细胞白血病的耐药机制研究

目的:探讨miR-155通过调节Wnt/β-Catenin信号通路促进小儿急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)对阿糖胞苷(Ara-C)化疗耐药的机制.方法:采用PCR检测B-ALL患儿骨髓组织与细胞系中miR-155表达情况;用REH细胞系构建化疗抵抗株REH/Ara-C,使用miR-155抑制剂转染REH/Ara-C细胞,EdU检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞的凋亡率,CCK-8法与克隆形成实验分析细胞耐药性,Western blot测定Wnt/β-Catenin信号通路相关蛋白的表达;用miR-155抑制剂与Wnt激活剂agonist转染REH/Ara-C细胞,测定其对细胞增殖、凋亡与耐药性的影响.结果:与正常组织及细胞相比,B-ALL骨髓组织/细胞系中miR-155表达水平升高(P＜0.05);与药物敏感B-ALL组织/细胞系相比,耐药B-ALL组织与细胞系中miR-155表达水平升高(P＜0.05);抑制miR-155表达降低了REH/Ara-C细胞增殖能力(P＜0.05),促进了凋亡(P＜0.05),增强了 Ara-C的细胞毒性(P＜0.05),同时抑制了Wnt/β-Catenin信号通路相关蛋白与耐药基因MDR1的表达(P＜0.05),通过激活Wnt表达则可逆转上述现象(P＜0.05).结论:B-ALL患儿骨髓组织中miR-155表达上调,可以通过激活Wnt/β-Catenin信号通路促进B-ALL细胞增殖、抑制细胞凋亡,从而导致化疗耐药.