Approche métabolomique in vitro du stress oxydatif induit par les acides aristolochiques sur la cellule endothéliale

Introduction La néphropathie aux acides aristolochiques (AA) se caractérise par une atrophie tubulaire et une fibrose interstitielle sévères mais aussi par une raréfaction des capillaires péritubulaires. L’hypoxie tissulaire induite pourrait contribuer à la progression rapide des lésions tubulo-interstitielles. Description Vu la production d’espèces réactives de l’oxygène rapportée dans une lignée de cellules endothéliales humaines (EAhy926) exposées aux AA [Toxicol In Vitro 2020 ;65 :104811], le but de ce travail est d’investiguer in vitro les changements métabolomiques AA-induits et les effets cytoprotecteurs éventuels du nébivolol (NEB), un β-bloquant présentant des propriétés antioxydantes [J Hum Hypertens 2017 ; 31 :376]. Méthodes Les cellules EAhy926 sont incubées en présence ou non de AA (50μM ou 100μM) et les effets d’une préincubation au NEB (10nM) sont évalués par le test de viabilité à la résazurine. La production d’H2O2 est mesurée par cytomètre en flux. Pour chaque condition expérimentale, les profils métabolomiques des extraits intracellulaires et des surnageants sont analysés par la spectroscopie 1H-RMN. Résultats Après 24h, les AA produisent des effets cytotoxiques marqués dose-dépendants et une production d’H2O2 nette, effets atténués par le NEB. Après 48h d’exposition aux AA, les principaux changements métabolomiques sont une diminution significative de l’arginine, du glutamate, de la glutamine et du glutathion ainsi qu’une augmentation significative de l’aspartate, de la glycérolphosphocholine et de l’UDP-N-acétylglucosamine. Le NEB inhibe significativement les changements en glutathion et glycérophosphocholine. Dans les surnageants des cellules intoxiquées, on observe une augmentation en glucose ainsi qu’une réduction en lactate et en glutamate, cette dernière étant significativement inhibée par le NEB. Conclusion Cette étude confirme la toxicité des AA vis-à-vis de la cellule endothéliale et la cytoprotection partielle du NEB. L’analyse métabolomique corrobore l’implication du stress oxydatif dans les lésions endothéliales. Le NEB semble être une molécule intéressante à explorer dans la prévention de l’hypoxie rénale d’origine toxique.