Polymyxin B antagonizingbiological activity of lipopolysaccharide in mice

目的 探讨多黏菌素B(PMB)拮抗内毒素(LPS)生物学活性的机制.方法观察PMB(1 mg/kg)对LPS(20 mg/kg)攻击的脓毒症模型小鼠的保护作用;应用生物传感器技术检测PMB与LPS和活性中心类脂A(lipidA)的亲和力,动态浊度法鲎试验观察PMB对LPS(2 ng/ml)的中和能力,酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测PMB对LPS(100ng/ml)刺激的小鼠腹腔巨噬细胞(PMΦ)释放肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素6(IL-6)的抑制作用,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测PMB对LPS(100ng/ml)刺激的小鼠PMΦ的Toll样受体4(TLR4)、TNF-α和IL-6 mRNA表达的影响.结果 PMB处理小鼠3 d存活率为65%,显著高于LPS组的15%(P＜0.01);PMB与LPS和LipidA具有高亲和力,其与二者的解离常数分别为18.9 nmol/L和11.1 nmol/L,对LPS具有显著的中和作用,并在蛋白和核酸水平均显著抑制LPS诱导PMΦ的TNF-α、IL-6和TLR4的释放和表达.结论 PMB可能通过抑制巨噬细胞活化实现对脓毒症小鼠的保护作用,其机制可能与PMB与LipidA结合后中和LPS的活性有关。