Использование микрокультурального иммуноферментного анализа для субтиповой идентификации циркулирующих вирусов гриппа А(Н1) и А(Н3)

Разработан чувствительный вариант микрокультурального ИФА (cell-ELISA) для субтиповой дифференциации современных вирусов гриппа А(Н1N1)pdm09 и А(Н3N2), циркулирующих в человеческой популяции. Метод основан на оценке репродукции вируса в инфицированной культуре клеток MDCK c использованием на стадии детекции cубтип-специфичных моноклональных антител (mAb), взаимодействующих с гемагглютинином (HA) вируса гриппа. При отработке метода использованы штаммы вирусов гриппа A, выделенные из клинических образцов в эпидемический сезон 2014 года. Показано, что при использовании mAb #1/#2 или #4 в концентрации 10–15 мкг/мл разработанный вариант cell-ELISA позволяет детектировать синтезируемый в зараженных клетках белок HA соответственно вирусов гриппа А(H3N2) или A(H1N1)pdm09. Разработанный метод может быть использован для идентификации современных штаммов вируса гриппа А в процессе их репродукции в клеточной культуре MDCK, что позволяет проводить субтипирование вирусов с низкой гемагглютинирующей активностью, когда невозможно использовать общепринятый метод – реакцию торможения гемагглютинации (РТГА).