Kardiyomiyoblast Hücre Regülasyonunda Taube Nuss Geninin Fonksiyonel Analizi

Gelişim evrelerinin veya dokuya özgü fizyolojik süreçlerin düzenlenmesinde ve yürütülmesinde farklılaşmış gen ekspresyonu büyük önem taşımaktadır. “Subtractive” hibridizasyon yöntemi dokuya özgü ekspresyonu olan genlerin tespit edilmesi için oldukça etkin bir yöntemdir. Daha önceki çalışmalarda laboratuvarımızda BALB/c ırkı farelerde kalbe özgü ekspresyonu olan genleri içeren “Subtractive” hibridizasyon cDNA kütüphanesi oluşturulmuştur. Önemli bir transkripsiyon faktörü olan Taube Nuss (Tbn), bu kütüphaneden elde edilen genlerden birisidir. Bu çalışmadaki amacımız, Tbn geni ile ilişkili olduğu düşünülen diğer genlerin ekspresyonlarının araştırılması ve Tbn yolağının belirlenmesidir. Çalışma kapsamında BALB/c ırkı farelerden elde edilen kalp ve iskelet kası dokularına özgü Tbn geninin ekspresyonu Northern Blot analizi ile araştırılmıştır. Ardından, Tbn genine özgü siRNA’lar kullanılarak H9c2 rat kardiyomiyoblast hücre soyunda Tbn geni sessizleştirilmiştir. Yolak analizleri sonucunda Tbn ile ilişkili olabileceği tespit edilen Pparg, Cebpa, Taf10 ve Myocd genlerinin sessizleştirilen hücrelerdeki ekspresyon değişimleri araştırılmıştır. Bu hücrelerde, Myocd gen ekspresyonunun azaldığı ve Pparg gen ekspresyonunun arttığı saptanmıştır. Bu sonuçlar, Tbn geninin kalp dokusunda düzenleyici bir rol oynadığını işaret etmektedir.