和厚朴酚对D-半乳糖致腰椎间盘退变大鼠血清炎症因子及细胞线粒体凋亡通路的影响
Chinese Journal of Comparative Medicine(2021)
Abstract
目的 探索和厚朴酚对D-半乳糖致腰间盘退变大鼠血清炎症因子含量变化,细胞外基质标记物表达水平及凋亡通路相关蛋白表达水平的影响.方法 45只SD大鼠随机分为对照组(Control)、D-半乳糖(D-galactose,D-gal)模型组(Model)、和厚朴酚低剂量组(2 mg/kg)、和厚朴酚中剂量组(4 mg/kg)、和厚朴酚高剂量组(8 mg/kg),每组9只.模型组和和厚朴酚给药组采用皮下注射D-gal方法建立大鼠椎间盘退变模型,对照组皮下注射等体积生理盐水.造模成功后,给药组大鼠分别灌胃和厚朴酚2、4、8 mg/kg,其余各组大鼠灌胃生理盐水,连续给药4周后处死大鼠.HE和番红O染色观察比较各组腰椎间盘形态组织学;qRT-PCR检测大鼠椎间盘组织细胞外基质标记物的mRNA水平;ELISA检测大鼠血清中白细胞介素IL-1β、IL-6、IL-10和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量的变化;TUNEL染色观察大鼠椎间盘的组织凋亡情况;Western blot检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)/Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶-9(Caspase-9)、Caspase-3、c-Myc的蛋白表达.结果 模型组和和厚朴酚低、中剂量组椎间盘组织形态学评分较对照组显著升高(P<0.05).和厚朴酚中、高剂量组椎间盘组织形态学评分较模型组显著降低(P<0.05).模型组和和厚朴酚低剂量组软骨受损严重,和厚朴酚中、高剂量组软骨受损较轻.和厚朴酚能显著升高SRY相关HMG盒9(SOX-9)、II型胶原(CollagenⅡ)和蛋白聚糖(Aggrecan)的表达水平(P<0.05).模型组和和厚朴酚低、中、高剂量组IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α的含量较对照组均显著升高(P<0.05).与模型组比较,和厚朴酚中、高剂量组IL-1β、IL-6和TNF-α含量均显著降低(P<0.05);IL-10的含量显著升高(P<0.05).与对照组相比,模型组和和厚朴酚低、中剂量组凋亡细胞数显著升高(P<0.05),Bcl-2/Bax比值显著降低(P<0.05),Caspase-9、Caspase-3、c-Myc的蛋白水平均显著升高(P<0.05).与模型组相比,和厚朴酚中、高剂量组凋亡细胞数显著降低(P<0.05),Bcl-2/Bax比值显著升高(P<0.05),Caspase-9、Caspase-3、c-Myc的蛋白水平均显著降低(P<0.05).结论 和厚朴酚对D-半乳糖致腰椎间盘退变有明显疗效.
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