环化PDC-E2内硫辛酰区及其在原发性胆汁性胆管炎患者抗线粒体抗体检测中的价值

目的 探讨丙酮酸脱氢酶复合物E2亚基(PDC-E2)内硫辛酰区域(ILD)环化后在原发性胆汁性胆管炎(PBC)患者抗线粒体抗体(AMA)检测中的抗原性变化及临床意义.方法 利用质粒pTWIN1提供的内含肽自我剪切技术,构建、表达和纯化环状ILD(cILD),采用Western blot法鉴定线状ILD和cILD的抗原性;选择PBC患者316例、类风湿性关节炎(RA)患者34例及健康对照36例,分别以PDC-E2、线状ILD及cILD为包被抗原,ELISA法比较检测受试者血清中AMA的阳性率.结果 Western blot结果显示,重组获得的线状ILD和cILD蛋白均具有与AMA结合的免疫原性;分别用PDC-E2、线状ILD及cILD为包被抗原,ELISA法检测AMA阳性率分别为93.04％ (294/316)、91.46％ (289/316)和85.76％(271/316),其中,cILD为包被抗原检测AMA阳性率低于PDC-E2检测阳性率(85.76％vs93.04％,P=0.003)和线状ILD检测阳性率(85.76％ vs 91.46％,P=0.024);PDC-E2和线状ILD检测AMA的阳性率差异无统计学意义(93.04％ vs 91.46％,P=0.744).PDC-E2和线状ILD检测AMA均呈阴性的21例PBC患者中,cILD检测出38.10％ (8/21)的AMA阳性率.结论 cILD对AMA的抗原性虽有所下降,但在传统检测AMA呈阴性的PBC患者临床诊断中,可能潜在新的临床实用价值.