人G蛋白偶联受体107表达载体构建及细胞定位的研究

目的 克隆人G蛋白偶联受体107(GPR107)基因以构建真核表达载体,并探讨GPR107在真核细胞中的亚细胞定位.方法 通过分子克隆技术克隆人GPR107基因的cD-NA;利用真核细胞表达载体pCMV-Tag2B构建重组载体pC-MV-Tag2B-GPR107,瞬时转染至293T 细胞,Western blot 检测GPR107的表达变化;采用免疫荧光标记,激光共聚焦显微镜观察GPR107在细胞中的定位.结果 经过基因测序证实获得人GPR107的cDNA;成功构建真核表达载体pCMV-Tag2B-GPR107;Western blot结果显示,与未转染组比较,转染组GPR107表达量明显上调.激光共聚焦显微镜观察显示GPR107主要表达于细胞质.结论 GPR107在293T细胞中过表达,并定位于细胞质.