仙茅苔黑酚类酚苷对去卵巢大鼠骨代谢和破骨细胞形成分化的影响

目的 探讨仙茅苔黑酚类酚苷(orcinol glucoside in Curculigo orchioideson,COOG)对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢及破骨细胞形成分化的影响.方法 3月龄Sprague-Dawley大鼠被随机分为正常对照组和去卵巢组.再将去卵巢大鼠分为5组,连续12周分别灌胃给0.5％的羧甲基纤维素钠(sodium carboxymethyl cellulose,CMC-Na)溶液,1 mg·kg-1尼尔雌醇(nilestriol,Nyl-1),15、45和135 mg·kg-1COOG.用双能X线吸收仪测定骨密度(bone mineral density,BMD),采用试剂盒测定血清和尿液的生化指标.RANKL诱导RAW264.7细胞分化为破骨细胞,抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色测定破骨细胞的数目;罗丹明-鬼笔环肽染色和激光共聚焦显微镜观察破骨细胞F-actin环的结构和形态;磷酸苯二钠法测定破骨细胞TRAP的活性;Elisa试剂盒测定破骨细胞组织蛋白酶K(cathepsin K,CK)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein-ase-9,MMP-9)的活性.结果 去卵巢大鼠骨密度显著降低,血清碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶活性升高,尿钙排出增加,血清抗氧化物水平降低.COOG在15、45和135 mg·kg-1剂量下,显著增加去卵巢大鼠的骨密度,显著降低血清抗酒石酸酸性磷酸酶活性,增加血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和还原型谷胱甘肽(fre-dused glutathione hormone,GSH)的水平,降低氧化产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量,减少尿钙排出.苔黑酚葡萄糖苷(sakakin,Sak)和苔黑酚龙胆二糖苷(orcinol gentiobioside,Og)显著抑制破骨细胞的形成分化、抑制破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶的活性、CK的活性和MMP-9的活性,抑制破骨细胞F-Actin环的形成.结论 COOG能够减缓去卵巢大鼠的骨丢失,抑制破骨细胞的形成、分化和骨吸收作用.