异黄腐酚与顺铂联合用药对肺癌顺铂耐药A549/DDP细胞的协同抑制作用

目的 探讨异黄腐酚(isoxanthohumol,IN)与顺铂(cis-platin,DDP)联合用药对肺癌DDP耐药A549/DDP细胞的协同抑制作用,并阐明其可能的分子机制.方法 以CCK-8法检测IN、DDP以及两药联用对A549/DDP细胞增殖的影响,并通过Isobologram分析两药联用的协同作用;将A549/DDP细胞分为空白组(未加任何药物处理)、IN组(20μmol·L-1 IN)、DDP组(6 mg·L-1 DDP)、IN+DDP联合用药组(20μmol·L-1 IN+6 mg·L-1 DDP),流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡率;Western blot法检测各组细胞中耐药相关蛋白P-gp、LRP、MRP和PI3 K/AKt通路中PI3 K和p-AKt蛋白表达.结果 与DDP组比较,IN与DDP联合用药可以明显降低DDP对A549/DDP细胞的IC50;Isobologram分析结果也表明二者联用对A549/DDP细胞具有协同抑制作用;与空白组、IN组、DDP组3组比较,IN+DDP联合用药组明显阻滞细胞周期在G0/G1期、增加A549/DDP细胞凋亡率(P<0.01)、降低A549/DDP细胞耐药蛋白P-gp、LRP和MRP的表达水平(P<0.01)及明显下调PI3 K和p-AKt蛋白表达水平(P<0.01).结论 IN与DDP两药联用可协同抑制A549/DDP细胞增殖、阻滞细胞周期和促进细胞凋亡,其机制可能与是通过抑制耐药蛋白P-gp、LRP和MRP的表达,及抑制PI3 K/AKt信号通路的活性,从而增强DDP对耐药细胞的作用有关.