hUC-MSC在成神经分化过程中的趋化迁移研究

目的 探究人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSC)向神经样细胞的分化,并对其分化的神经样细胞的趋化作用进行研究.方法 检测hUC-MSC细胞表面的标记;无血清的诱导培养基[含2％二甲基亚砜(DMSO)和200μ xmol/L 丁羟基茴香醚(BHA)]诱导其向神经细胞分化,并进行神经细胞特异性标志物神经上皮干细胞蛋内(nestin)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的免疫荧光染色检测,并对分化的成神经诱导过程中的形态变化进行鉴定.此外,不同分化状态的hUC-MSC,在加入500 μ含有20 ng/ml.浓度的基质细胞衍生因子(stromal Cell-derived Factor-la,SDF-1α)的不含血清的L-DMEM培养基,利用倒置相差显微镜下拍照,统计迁移至室膜下方的细胞数.结果 成功分离出hUC-MSC,行流式细胞仪检测结果显示MSC:CD71十、CD29+,而CD34—、CD45—符合MSC的生物学特征.对不同诱导时间的hUC-MSC免疫荧光结果的统计学分析,nestin的表达呈现出先增高后降低的趋势,NSE在诱导期和维持前期均为阴性,在整个过程中末期才开始表达,到维持48 h时有62.5％的细胞表达.维持72 h时有76.5％的细胞表达.不同成神经分化状态的hUC-MSC迁移能力不同,诱导30 h,细胞向SDF-la的趋化迁移能力达到最强.结论 hUC-MSC具有易分离并扩增培养的生物特性,能诱导分化成为成神经细胞,并且具有一定的迁移能力,该研究能为中枢神经系统细胞的移植提供理论基础.