含笑内酯通过促进自噬增强结直肠癌细胞对奥沙利铂的敏感性

目的:研究含笑内酯(micheliolide,MCL)对结直肠癌细胞奥沙利铂(oxaliplatin,OxP)敏感性的影响及其可能的作用机制.方法:采用2 μmol/L MCL、100 μmol/L OxP单独或联合处理结直肠癌HCT116、Lovo细胞,CCK-8法、平板克隆实验分别检测对细胞活力和体外克隆形成能力的影响;HCT116细胞转染GFP-LC3慢病毒后采用2、5 μmol/L MCL分别处理24 h,荧光显微镜下直接观察MCL诱导HCT116细胞中自噬小体聚集情况,WB检测MCL对LC3B-Ⅰ、LC3B-Ⅱ、p62和STAT3表达的影响;Autodock Version构建MCL和STAT3的分子对接模型.结果:2 μmol/L MCL联合100 μmol/L OxP后,可以导致结直肠癌HCT116和LoVo细胞活力显著降低(均P＜0.01),使HCT116细胞的克隆形成率显著降低(P＜0.01);2、5 μmo4/L MCL处理组HCT116细胞自噬率均显著高于对照组(均P＜0.01),LC3B Ⅱ/Ⅰ比例为对照组的3.25和5.78倍,p62表达水平为对照组的25.5％和9.8％,STAT3的磷酸化水平为对照组的2.18和3.87倍;分子对接结果显示MCL可能和STAT3蛋白在体内直接结合.结论:MCL可能通过STAT3通路促进结直肠癌细胞自噬,从而增强其对OxP的敏感性.