lncRNA RPA3-AS1/miR-203a-3p/BAG3分子轴对人心肌细胞凋亡的影响
International Journal of Laboratory Medicine(2021)
Abstract
目的 探究长链非编码(lncRNA)RPA3-AS1影响人心肌细胞凋亡的作用机制.方法 采用实时定量聚合酶链反应(qPCR)技术检测43例急性心肌缺血患者和43例体检健康者全血样本中RPA3-AS1的表达.分别转染载有RPA3-AS1序列的质粒和阴性对照质粒至人心肌细胞系AC16,设为实验组和对照组.采用qPCR确定转染效率.细胞增殖实验(MTT法)和流式细胞术分别检测两组AC16细胞的活力和凋亡情况.生物信息学方法预测RPA3-AS1的作用机制.qPCR和Western blot法分别检测RPA3-AS1靶基因的表达.结果 与体检健康者相比,急性心肌缺血患者全血中RPA3-AS1的表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.01).与对照组相比,实验组AC16细胞中RPA3-AS1的表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.01),细胞活力显著增加,差异有统计学意义(P<0.05),细胞凋亡率显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).RPA3-AS1的靶标可能是微小RNA-203a-3p(miR-203a-3p),miR-203a-3p的靶基因可能是Bcl-2相关抗凋亡蛋白3(BAG3).与对照组相比,实验组AC16细胞中miR-203a-3p的表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.01),BAG3基因的表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.01).结论 RPA3-AS1可能通过影响miR-203a-3p/BAG3分子轴,促进人心肌细胞的活力并抑制其凋亡,从而保护人心肌细胞.
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