冬凌草甲素对肝癌细胞增殖、凋亡及mTOR/P70S6K信号通路的影响

目的:探讨不同浓度的冬凌草甲素对肝癌SMMC-7721细胞生物学行为及对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/P70S6激酶(P70S6K)信号通路的影响.方法:将人肝癌SMMC-7721细胞分为肝癌组及冬凌草甲素低、中、高剂量组(以下简称低、中、高剂量组).肝癌组不作任何处理,低、中、高剂量组分别用浓度为5、20、40μmol/L的冬凌草甲素溶液处理.四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组SMMC-7721细胞活性,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法和PCR法分别检测各组SMMC-7721细胞中mTOR、P70S6K蛋白及mRNA表达.结果:细胞形态学观察显示,肝癌组细胞呈现单层生长,互相堆积,形态为梭形并呈现继续生长;低、中、高剂量组细胞形态逐渐发生改变,并随着药物浓度的提高,细胞数目减少,核缩严重并出现大面积凋亡.与肝癌组比较,中、高剂量组各时间点细胞抑制率均升高(P＜0.05);与低剂量组比较,中、高剂量组各时间点细胞抑制率均升高(P＜0.05);与中剂量组比较,高剂量组各时间点细胞抑制率升高(P＜0.05);且中、高剂量组细胞抑制率均随着时间的增加而升高.与肝癌组比较,中、高剂量组细胞凋亡率升高(P＜0.05),mTOR、P70S6K蛋白及mRNA表达均下降(P＜0.05);与低剂量组比较,中、高剂量组细胞凋亡率升高(P＜0.05),mTOR、P70S6K蛋白及mRNA表达均降低(P＜0.05);与中剂量比较,高剂量组细胞凋亡率升高(P＜0.05),mTOR、P70S6K蛋白及mRNA表达均降低(P＜0.05).结论:冬凌草甲素能够促进人肝癌SMMC-7721细胞凋亡、抑制其活性,其减少mTOR/P70S6K信号通路活性可能与细胞凋亡机制相关.