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乳粉中肺炎克雷伯氏菌核酸提取方法比较

林碧莲,张芳,宋帆,张雅薇, 傅德江(通讯作者),韩涛

CHINA FOOD INDUSTRY(2021)

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摘要
研究以牛奶中的致病性肺炎克雷伯氏菌作为研究对象,通过阳性菌株加标提取细菌核酸,用异硫氰酸 胍法、改良SDS-CTAB法、高温裂解法和试剂盒法分析比较,选用紫外分光光度计法和实时荧光PCR法对各方 法进行系统评估。目的是建立稳定高效的婴幼儿配方奶粉中肺炎克雷伯氏菌核酸(DNA)的提取方法。四种方法均 能有效从人工污染肺炎克雷伯氏菌的乳粉中提取到肺炎克雷伯氏菌的DNA,异硫氰酸胍法提取效率较高,但费时 费力。高温裂解法操作简单、提取时间短,但DNA提取效率较低,试剂盒法提取的DNA效率和产量相对较高、质 量稳定、易标准化、方法重现性较好。
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