黄鳍金枪鱼酶解物免疫活性及其氨基酸分析

本文旨在研究黄鳍金枪鱼(Thunnus albacares)碎肉中4种不同蛋白酶酶解物的3k Da超滤组分对RAW264.7细胞的免疫活性.以RAW264.7细胞为实验模型,采用噻唑蓝比色法检测细胞增殖活性,中性红吞噬实验检测细胞吞噬能力,Griess试剂检测细胞培养上清液中NO含量,并分析酶解物氨基酸组成和分子量分布.实验结果表明,胰蛋白酶酶解物在12.5～200μg·mL–1范围内无明显细胞毒性,能增强RAW264.7细胞吞噬能力,浓度为400μg·mL–1时达到最大值132.50％(P<0.01),浓度在50～200μg·mL–1范围内能促进巨噬细胞NO释放(P<0.01),且NO释放量与酶解液浓度存在一定的量效关系;胰蛋白酶酶解物中必需氨基酸(essential amino acid,EAA)含量最高,为51.09％,其碱性氨基酸组氨酸、赖氨酸和精氨酸的含量分别为11.59％、11.00％和6.90％,均高于其他蛋白酶酶解物,并且分子量小于1k Da的小肽含量高达97.48％.研究结果表明,4种蛋白酶酶解物中,黄鳍金枪鱼碎肉胰蛋白酶酶解物的3k Da组分具有较明显的免疫活性,这为其作为免疫活性肽的开发利用提供了理论依据.