顺铂连续和间隔造模诱发的药源性虚证小鼠类固醇激素合成能力的比较研究

目的 研究顺铂不同给药方案对小鼠类固醇激素合成及储备功能的影响.方法 40只雌性ICR小鼠分为4组,顺铂连续和间隔造模组以及两个对照组.顺铂连续造模组给药7 d,每天注射3 mg/kg顺铂;间隔造模组每周注射1次10 mg/kg顺铂,共4次.末次造模前进行旷场实验、转棒疲劳实验、抓力测试;次日处死前称体重,摘取小鼠心脏、脾、胸腺和双侧肾并称重;RT-qPCR检测下丘脑GnRH和CRH、垂体Pomc、Fshb、Lhb、Pou1f1基因表达,以及肾上腺和卵巢类固醇合成酶(StAR、Cyp11a1、Cyp21a1、Cyp17a1、Cyp11b1、Hsd3b2、Cyp19a1、Hsd17b1)及受体(Esr1、Esr2和Gper1)基因表达;Western Blot检测肾上腺和卵巢StAR、CYP11A1、CYP21A2和CYP11B1蛋白表达.结果 与对照组比较:(1)不同频次顺铂造模均可抑制小鼠体重增长,顺铂累积后可以诱导小鼠气虚证表现,并抑制脏器质量.(2)不同频次顺铂造模均能加速激活原始卵泡分化,产生大量闭锁卵泡,诱导膜细胞及颗粒细胞凋亡,健康的成熟卵泡减少;但对肾上腺组织和细胞形态影响不大.(3)连续造模后肾上腺StAR蛋白表达下调;间隔造模后StAR升高,但下调CYP11B1蛋白表达.(4)连续造模后,卵巢Cyp11a1、Hsd3b2、Esr1和Gper1基因表达上调,Star和Cyp17a1基因表达下调;间隔造模后StAR蛋白表达和Hsd3b2基因表达下调.(5)顺铂连续造模后下丘脑GnRH和CRH基因表达明显下调.(6)顺铂连续造模后垂体Pomc、Fshb、Pou1f1基因表达升高,而间隔造模组Lhb表达下降.结论 顺铂能够诱发小鼠气虚、精气不足证的相关表现;合成类固醇激素的卵巢受到选择性损伤大于肾上腺,短期连续给药也进一步抑制HPA轴和HPG轴的高级中枢下丘脑和垂体功能.