基于流式细胞仪高通量分选的深海微生物单细胞培养

[目的]建立适用于海洋微生物的流式细胞分选与高通量单细胞培养的方法,通过该方法从印度洋深海样品中分离微生物纯培养菌株.[方法]利用流式细胞仪单细胞分选功能,以前向角(FSC)和侧向角(SSC)散射光信号代替荧光信号作为分选逻辑,对深海水体和沉积物样品中微生物进行单细胞高通量分选和培养.[结果]确定了流式细胞分选的区域和条件,发现所建立方法适于分离海洋水体微生物,而不是沉积物微生物.从印度洋深海水体样品中获得61个潜在新菌株,分属于6个新属种,占分离菌株总数的26.29％,其16S rRNA基因序列与已培养的模式菌株相似性为89.79％-95.37％.[结论]本研究所建立的方法有助于提高发现海洋微生物新物种的效率,获得更多新的海洋微生物资源.