新型冠状病毒灭活疫苗(Vero细胞)中β-丙内酯残留气相色谱检测方法的建立、优化及验证

目的 建立新型冠状病毒灭活疫苗(Vero细胞)中β-丙内酯(β-propiolactone,BPL)残留量的气相色谱检测方法,并进行优化及验证.方法 气相色谱条件:进样口温度为180℃,分流比为2∶1,载气为氮气,检测器温度为250℃,运行时间为10 min.对柱温条件(升温程序和等温程序)、流速(1和3 mL/min)和进样量(1和0.2μL)进行优化.同时验证方法的专属性、检测限及定量限、线性范围、重复性、耐用性.采用建立的方法检测新型冠状病毒灭活疫苗(Vero细胞)生产工艺中灭活和水解过程及疫苗原液中BPL含量的变化.结果 最佳检测条件:柱温条件为等温程序,流速为3 mL/min,进样量为0.2μL.BPL对照品溶液与疫苗原液混合液的BPL峰保留时间为2.328 min,与BPL对照品溶液一致;BPL对照品溶液连续6次进样的峰面积和保留时间的RSD均≤4.0％;BPL对照品溶液在不同检测器温度及进样口温度条件下检测的峰面积和保留时间的RSD均≤4.0％;BPL对照品溶液在3.125～ 500 μg/mL浓度范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系,回归方程为y=1.399 1 x-0.558 6,相关系数(r)为0.999 9;定量限为2.530 μg/mL,检测限为0.843 μg/mL.疫苗灭活过程中BPL含量高于定量限,水解后其含量远低于检测限;疫苗原液中未检测到BPL.结论 建立了新型冠状病毒灭活疫苗(Vero细胞)中BPL残留含量的气相色谱检测方法,该方法具有良好的专属性、精密性及耐用性,可用于检测疫苗各生产环节中BPL的含量.