生产过程中Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗的灭活效果验证

目的 对Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Sabin inactivated poliovirus vaccine,sIPV)在生产过程中的灭活效果进行验证及评价.方法 分别制备Sabin株Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ型脊髓灰质炎病毒连续5批纯化液,加入终浓度为92.5 μg/mL的甲醛,37℃灭活12d.收集灭活前(0 d)及灭活1～6、9和12 d样品,采用人喉癌上皮细胞(Hep-2)通过细胞病变法检测0～6 d样品的病毒滴度,ELISA法检测不同灭活时间样品的D抗原含量,并验证9及12d样品的灭活效果.结果 Sabin株Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ型脊髓灰质炎病毒均在灭活第3天下降至0.00 lgCCID50/mL,3种型别病毒同日的灭活速率差异无统计学意义(P＞0.05).灭活动力学曲线显示,0～3d样品的病毒滴度呈直线下降,病毒灭活效果与灭活时间密切相关(Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ型相关系数r分别为-0.995、-0.976及-0.996,R2分别为0.991、0.952及0.992).Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ型病毒12d样品D抗原平均回收率分别为80％、85％和83％,抗原有一定的损失,但差异无统计学意义(P＞0.05).灭活9及12 d样品灭活验证结果均为阴性.结论 Sabin株脊髓灰质炎病毒在目前的灭活工艺条件下,均可稳定地被灭活,且能收获含量较高的D抗原,保证了sIPV疫苗的稳定性及安全性.