培养条件对百日咳杆菌发酵中百日咳毒素及丝状血凝素表达的影响

目的 探讨培养条件对百日咳杆菌发酵中百日咳毒素(pertussis toxin,PT)和丝状血凝素(filamentous haemag-glutinin,FHA)表达的影响.方法 采用300 L全自动发酵罐进行百日咳杆菌发酵培养,培养基为百日咳S-S培养基,搅拌通气培养,培养量200 L,温度35～37℃,培养时间40 h,接种比例1 ∶ 12～1 ∶ 15.试验分为高PT表达组(搅拌转速为160 r/min,搅拌叶片为直叶,有挡板,培养0-20及21-40 h的通气量分别为600和400 L/min)、高FHA表达组(搅拌转速为220 r/min,搅拌叶片为弯叶,无挡板,培养0～20及21～40 h的通气量分别为400和600 L/min)及对照组(搅拌转速为180 r/min,搅拌叶片为直叶,有挡板,通气量为500 L/min),每组平行培养3批培养物.于培养结束时采用ELISA法检测PT及FHA含量.结果 高PT表达组PT含量平均值达3.16 μg/mL,比对照组(平均值2.23 μg/mL)提升了 41.7％(P＜0.05);高FHA表达组FHA含量平均值达21.37 μg/mL,比对照组(平均值11.00μg/mL)提升了 94.3％(P＜0.05).结论 百日咳发酵工艺中,高搅拌剪切力和较低的溶氧水平有利于PT的表达,低剪切力和高溶氧水平有利于提高FHA的产量.