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短发夹RNA沉默丝裂原活化蛋白激酶1对胃癌细胞生物学表型的影响及其分子机制

Chinese Journal of Biologicals(2021)

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摘要
目的 探讨短发夹RNA (short hairpin RNA,shRNA)沉默丝裂原活化蛋白激酶1(mitogen-activated protein kinase 1,MAPK1)对胃癌细胞生物学表型的影响及其分子机制.方法 SGC-7901和HGC-27细胞按MOI=20分别感染慢病毒LV-sh-MAPK1、LV-sh-Ctrl(分别为两种细胞的试验组及阴性对照组).RT-qPCR及Western blot法检测SGC-7901及HGC-27细胞中MAPK1的沉默效果,MTT法检测细胞的增殖能力,细胞划痕愈合试验和Transwell小室试验检测细胞的迁移能力,Transwell小室试验检测细胞的侵袭能力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡,Western blot检测细胞周期及凋亡相关信号因子的表达情况.结果 与阴性对照组比较,试验组细胞中MAPK1基因mRNA及蛋白表达水平均显著降低(P<0.01);细胞增殖、侵袭、迁移能力均显著降低(P<0.01);凋亡率显著增加(P<0.01),且细胞阻滞于G1期;CDK6、Bax、Caspase 3、C-Caspase 3、Caspase 9、C-Caspase 9的表达水平明显上调(P<0.01),CDK1、CCNB1、Bcl-2表达水平明显下调(P<0.01).结论 沉默MAPK1可抑制人胃癌细胞的增殖、侵袭、迁移能力,促进细胞凋亡,并将其阻滞在G1期.
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