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circ 0000218通过靶向吸附miR-1182对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响

Chinese Journal of Cell and Stem Cell(2021)

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摘要
目的 探讨环状RNA 0000218 (circ_0000218)是否通过靶向吸附miR-1182从而影响宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭.方法 采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)技术分析43例宫颈癌患者癌组织、癌旁组织中circ_ 0000218和miR-1182的表达水平.根据转染序列不同分为si-NC组、si-circ_ 0000218组、miR-NC组、miR-1182组、pcDNA组、pcDNA-circ_ 0000218组、si-circ_ 0000218+anti-miR-NC组、si-circ_ 0000218+anti-miR-1182组.运用细胞计数试剂盒(CCK-8)法、Transwell实验分析circ 0000218和miR-1182表达对HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响.蛋白质印迹法检测Ki-67、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP9蛋白表达.双荧光素酶报告实验和RT-qPCR分析circ 0000218和miR-1182的靶向关系.癌旁组织与宫颈癌组织比较采用配对t检验,两组间比较采用独立样本t检验进行统计学分析.结果 宫颈癌组织中circ 0000218表达量高于癌旁组织(4.17±0.32比1.00±0.05),而miR-1182表达量低于癌旁组织(0.33±0.03比1.00±0.05),差异具有统计学意义(P均<0.001).与si-NC组比较,si-circ_ 0000218组HeLa细胞增殖活力(0.86±0.04比0.37±0.03)、迁移数量[(86.73±7.13)个比(38.52±3.19)个]和侵袭数量[(66.80±4.95)个比(26.58±2.55)个]以及Ki-67(0.57±0.05比0.18±0.02)、MMP-2(0.74±0.07比0.28±0.03)和MMP-9蛋白表达量(0.64±0.04比0.22±0.02)降低,差异有统计学意义(P均<0.001).与miR-NC组比较,miR-1182组HeLa细胞增殖活力(0.88±0.04比0.46±0.04)、迁移数量[(89.74±5.53)个比(46.63±3.79)个]和侵袭数量[(68.03±4.34)个比(34.63±3.37)个]以及Ki-67 (0.59±0.04比0.24±0.02)、MMP-2 (0.76±0.05比0.33±0.03)和MMP-9蛋白表达量(0.66±0.04比0.29±0.03)降低,差异有统计学意义(P均<0.001).circ_ 0000218靶向负调控miR-1182表达.与si-circ_ 0000218+ anti-miR-NC组比较,si-circ_ 0000218+ anti-miR-1182组HeLa细胞增殖活力(0.35±0.03比0.76±0.04)、迁移数量[(35.58±3.11)个比(77.04±4.08)个]和侵袭数量[(25.44±2.29)个比(57.61±3.47)个]以及Ki-67(0.16±0.02比0.46±0.04)、MMP-2(0.26±0.02比0.65±0.04)和MMP-9蛋白表达量(0.20±0.02比0.57±0.04)升高,差异有统计学意义(P均< 0.001).结论 circ 0000218通过靶向吸附miR-1182可促进宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭.
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