聚乙二醇化胰高血糖素样肽1类似物生物活性的报告基因法测定
International Journal of Biologicals(2021)
摘要
目的:建立检测聚乙二醇化胰高血糖素样肽1类似物(polyethylene glycolylated glucagon-like peptide-1 analogue,PEG-GLP-1a)生物活性的报告基因法,并对该方法进行验证。方法:将人胰高血糖素样肽1受体表达载体和分泌型碱性磷酸酶(secreted alkaline phosphatase, SEAP)报告基因载体瞬时共转染HEK293T细胞,培养后加入PEG-GLP-1a刺激细胞分泌SEAP,使用SEAP报告基因检测试剂盒进行测定,并验证其专属性、准确性、精密度、稳定性等指标。结果:人胰高血糖素样肽1受体和SEAP双载体瞬时共转染的HEK293T细胞对PEG-GLP-1a具有强反应性。使用该方法测定PEG-GLP-1a具有良好的专属性。加标回收率为97.6%~102.2%,准确性较好。不同测定日期的日内半数效应浓度的变异系数均不超过10.22%,不同测定日期的日间半数效应浓度的变异系数均不超过13.02%。结论:报告基因法可以用于PEG-GLP-1a的生物活性检测。
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关键词
Glucagon-like peptide-1,Alkaline phosphatase,Gene, reporter
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![](https://originalfileserver.aminer.cn/sys/aminer/pubs/mrt_preview.jpeg)
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