HBcAg特异性Th9细胞在乙型肝炎病毒感染者中的免疫调控作用

目的:观察乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染者中非特异性和乙型肝炎核心抗原(HBcAg)特异性Th9细胞、白细胞介素-9(IL-9)的变化及其对CD8 +T细胞功能的影响。 方法:纳入2018年1月至2019年1月在新乡医学院第一附属医院就诊的急性乙型肝炎(acute hepatitis B，AHB)患者12例、慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B，CHB)患者58例、健康对照者20例，分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMCs)和血浆，流式细胞术检测非特异性Th9细胞(CD3 +CD4 +IL-9 +)和HBcAg特异性Th9细胞，ELISA检测血浆IL-9水平。CHB患者接受富马酸替诺福韦二吡呋酯片(tenofovir disoproxil fumarate，TDF)抗病毒治疗，观察抗病毒治疗48周时非特异性Th9细胞、HBcAg特异性Th9细胞和血浆IL-9的变化。分选12例HLA-A2限制性CHB患者的CD4 +CCR4 -CCR6 -CXCR3 -细胞(即Th9细胞)和CD8 +T细胞，与HepG2.2.15细胞共培养，同时在培养液中加入抗IL-9中和抗体，检测HepG2.2.15细胞死亡比例和IFN-γ、TNF-α水平。组间比较采用 t检验、单因素方差分析或SNK- q检验。 结果:非特异性Th9细胞和血浆IL-9水平在AHB患者、CHB患者和对照者之间的差异无统计学意义( P>0.05)，CHB患者中HBcAg特异性Th9细胞低于AHB患者[(2.49±0.61)% vs (3.19±0.62)%， P<0.001]，CHB患者中HBcAg特异性Th9细胞与HBV DNA呈显著负相关( r＝-0.385， P＝0.003)，但与丙氨酸转氨酶(ALT)无显著相关性( P>0.05)。TDF抗病毒治疗48周可显著升高CHB患者HBcAg特异性Th9细胞比例[(2.94±0.48)%， P<0.001]，但对非特异性Th9细胞和血浆IL-9水平无显著影响( P>0.05)。CHB患者HBcAg特异性Th9细胞的杀伤活性低，但可诱导CD8 +T细胞对HepG2.2.15细胞杀伤作用增强，主要表现为HepG2.2.15细胞死亡比例增加、IFN-γ和TNF-α水平升高，抗IL-9中和抗体可降低HBcAg特异性Th9细胞对CD8 +T细胞杀伤功能的增强作用( P<0.001)。 结论:慢性HBV感染可能抑制HBcAg特异性Th9细胞水平和功能，诱导感染慢性化。