基于BDNF-TrkB信号通路探讨和血生络方对脑缺血大鼠认知功能的影响及机制研究

目的:基于BDNF-Trk B信号通路探讨和血生络方对脑缺血大鼠认知功能的影响及其作用机制.方法:成年雄性 SD大鼠随机分为假手术组、模型组、和血生络方组和和血生络方+抑制剂组,采用改良Zea-Longa大脑中动脉缺血造模方法建立脑缺血大鼠模型,和血生络方组与和血生络方+抑制剂组给予和血生络方浓缩液灌胃给药18.9 mg/(kg·d),持续 14 d,假手术组和模型组给予等量 0.9%氯化钠溶液灌胃.采用水迷宫试验评价大鼠认知功能.免疫荧光染色观察Brd U+/Nestin+细胞和Brd U+/DCX+在海马齿状回颗粒细胞下层的表达;RT-PCR法检测齿状回颗粒细胞下层中 Nestin、DCX、BDNF及Trk B的基因表达;Western blot检测齿状回颗粒细胞下层中Nestin、DCX 、BDNF及Trk B的蛋白表达.结果:水迷宫实验显示,与模型组和和血生络方+抑制剂组比较,和血生络方组大鼠的逃避潜伏期均显著缩短(P＜0.05 ),穿越平台次数显著增加(P＜0.05 ).免疫荧光结果显示,在PMD3 、PMD7 和PMD1 4,与模型组、和血生络方+抑制剂组比较,和血生络方组显著增加了 Brd U+/Nestin+细胞和Brd U+/DCX+细胞在齿状回颗粒细胞下层的表达(P＜0.05 ).RT-PCR 结果表明,在 PMD3 、PMD7 和PMD1 4,与模型组、和血生络方+抑制剂组相比,和血生络方组 MCAO 大鼠齿状回颗粒细胞下层 Nestin、DCX、BDNF及Trk B的 mRNA表达水平显著增高(P＜0.05).Western blot 结果显示出与 RT-PCR 结果相似的趋势.结论:和血生络方能够改善脑缺血大鼠的学习、记忆和空间定位能力,其作用机制与通过上调 BDNF-Trk B信号通路促进海马齿状回颗粒细胞下层神经再生有关.