稳心颗粒调控内质网应激途径抑制心梗大鼠心肌凋亡的机制

目的:探讨稳心颗粒对心梗大鼠内质网应激凋亡通路的影响及分子机制.方法:结扎左冠状动脉前降支建立心梗大鼠模型,术后随机分为假手术组,模型组,稳心颗粒低剂量组、高剂量组及倍他乐克组,每组10只,假手术组与模型组给予10 mL.kg1.d-1去离子水灌胃,稳心颗粒低剂量及高剂量组分别给予1.35,2.7 g?kg 1?d-1水溶液灌胃,倍他乐克组给予2.25 mg*kg-1.d-1水溶液灌胃,治疗2周后,采用导管法检测心脏血流动力学,之后处死大鼠取材,苏木素.伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织病理形态的变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测内质网应激蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78),蛋白激酶R样内质网激酶(PERK),磷酸化激活的PERK(p-PERK),活化转录因子6(ATF6),细胞核转录因子X盒结合蛋白(XBP1)和凋亡蛋白C/EBP同源蛋白(CHOP),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达变化,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡.结果:与假手术组比较,模型组的左室内压最大上升速率(+dp/dtmax),下降速率(-dp/dtmax),左室收缩压(LVSP)明显降低(P＜0.05),左室终末舒张压(LVEDP)明显上升(P＜0.05),内质网应激蛋白GRP78,p-PERK,PERK,ATF6及XBP1表达均明显升高(P＜0.05,P＜0.01),凋亡蛋白CHOP和Bax表达显著增高(P＜0.01),Bcl-2蛋白及Bcl-2/Bax显著降低(P＜0.01),凋亡指数显著增加(P＜0.01);与模型组比较,稳心颗粒低剂量组-dp/dtmax及Bcl-2蛋白表达明显增加(P＜0.05),心肌细胞凋亡指数显著降低(P＜0.01);稳心颗粒高剂量组+dp/dtmax与-dp/dtmax明显增加(P＜0.05,P＜0.01),内质网应激通路蛋白GRP78,p-PERK,PERK,ATF6,XBP1及凋亡相关蛋白CHOP,Bax表达均显著降低(P＜0.01),Bcl-2蛋白及Bcl-2/Bax显著增加(P＜0.01),凋亡指数显著降低(P＜0.01).结论:稳心颗粒可抑制过度的内质网应激,减少心肌细胞凋亡,进而改善心梗大鼠心脏血流动力学,其分子机制与下调GRP78,PERK,p-PERK,ATF6,XBP1表达,减少CHOP,Bax表达,增加Bcl-2表达有关.