温经通络汤对膝骨关节炎模型小鼠VEGF/VEGFR2/ERK1/2信号通路的影响

目的:探讨温经通络汤改善膝骨关节炎关节(KOA)软骨缺损,延缓关节退变的可能作用机制.方法:采用前交叉韧带切除术(ACLT法)建立KOA模型,实验分为假手术组、模型组、温经通络汤组(高、低剂量)和阳性药组.造模4周后中药组分别予以高、低剂量(80,20 g·kg-1)的温经通络汤灌胃;阳性药组予以硫酸氨基葡萄糖胶囊(0.29 g·kg-1);假手术组与模型组均予等体积生理盐水灌胃.连续干预4周后苏木素-伊红(HE)染色观察软骨组织形态学变化并进行Mankin's评分;蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测血管内皮生长因子A(VEGFA),血管内皮生长因子受体2(VEGFR2),细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)和血小板反应蛋白解整合素金属肽酶4(ADAMTS4)蛋白和mRNA的表达.结果:HE染色结果显示与假手术组比较,模型组小鼠Mankin's评分显著升高(P＜0.01);与模型组比较,药物组均能明显改善造模引起的关节软骨面缺损,Mankin's评分均有显著降低(P＜0.01),但各给药组间差异无有统计学意义.与假手术组比较,模型组VEGFA,VEGFR2,ERK1/2和ADAMTS4蛋白和mRNA的表达显著升高(P＜0.01).与模型组比较,各给药组可以显著抑制VEGFA和ERK1/2的蛋白表达(P＜0.01),硫酸氨基葡萄糖胶囊组效果要优于温经通络汤低剂量组(P＜0.05),但弱于温经通络汤高剂量组(P＜0.01);硫酸氨基葡萄糖胶囊组可以抑制VEGFR2和ADAMTS4的蛋白表达,作用与温经通络汤低剂量组相当,作用均弱于温经通络汤高剂量组(P＜0.05).结论:温经通络汤可以改善KOA小鼠关节软骨损伤,其作用机制可能与VEGF/VEGFR2/ERK1/2信号通路有关.