基于"心与小肠相表里"探讨松萝抗大鼠动脉粥样硬化及对回肠菌群的影响

目的:在"心与小肠相表里"中医理论指导下,探讨松萝治疗动脉粥样硬化(AS)大鼠与回肠肠道菌群的关系.方法:48只SD大鼠随机分为正常组8只和造模组40只,采用高脂饲料联合腹腔注射维生素D3建立AS模型.造模组大鼠随机分为5组,模型组、辛伐他汀组(4 mg·kg-1)和松萝醇提物低(0.7 g·kg-1),中(1.4g·kg-1),高剂量组(2.8 g·kg-1),每组8只.干预治疗4周后,收集各组大鼠血液、主动脉、回肠及回肠内容物.酶联免疫吸附法检测大鼠血清脂多糖(LPS),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)的含量,苏木素-伊红(HE)染色法检测大鼠胸主动脉病理形态,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠回肠组织紧密连接蛋白闭锁小带蛋白-1(ZO-1),闭合蛋白(Occludin)的蛋白表达,16S rRNA高通量测序技术检测各组大鼠回肠肠道菌群多样性和丰度的变化.结果:与正常组比较,模型组大鼠主动脉斑块沉积明显,血清LPS,TNF-α,IL-6的含量均显著升高(P＜0.01),回肠组织ZO-1,Occludin的蛋白表达显著降低(P＜0.01).与模型组比较,松萝能明显改善模型大鼠主动脉的斑块沉积,降低血清LPS,TNF-α,IL-6的含量(P＜0.05,P＜0.01),同时提高紧密连接蛋白ZO-1,Occludin的蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01).与正常组比较,模型组变形菌门Proteobacteria和拟杆菌门Bacteroidetes的丰度发生显著变化,Bacteroidetes/厚壁菌门(Firmicutes)(B/F)明显降低(P＜0.05).Alpha和Beta多样性分析表示模型组肠道菌群物种总数较高,但丰度较低且分布不均(P＜0.05,P＜0.01),且富集大量致病菌.与模型组比较,松萝醇提物可显著升高B/F值,改善模型大鼠回肠菌群结构的紊乱,降低致病菌、提高益生菌的相对丰度.结论:松萝对AS具有良好的治疗效果,其作用机制可能是与改善肠道菌群结构紊乱,增强肠黏膜屏障,降低血清LPS及炎症因子水平有关.