逍遥散正丁醇部位基于IGF-1Rβ/PI3K/Akt信号通路的抗抑郁作用

目的:观察逍遥散正丁醇部位对慢性不可预知应激(CUMS)模型小鼠抑郁样行为的干预作用,及其作用发挥与调控类胰岛素生长因子-1受体β(IGF-1Rβ)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路的关系.方法:首先基于小鼠行为绝望模型初步获得逍遥散正丁醇部位发挥抗抑郁作用的有效剂量.再将雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、氟西汀组、逍遥散组、逍遥散正丁醇部位20,40 g·kg-1组,采用CUMS法建立抑郁症模型小鼠研究其抗抑郁作用及机制,以糖水偏好实验检测造模效果.模型成功后,各给药组连续灌胃小鼠5周,正常组与模型组给予等体积溶媒.第5周末,开展小鼠糖水偏好实验、悬尾实验及新奇环境抑制进食实验;酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定小鼠血清、海马区类胰岛素生长因子-1(IGF-1)含量,甲苯胺蓝染色法检测海马CA3区神经元尼氏小体平均光密度,免疫荧光法标记海马齿状回(DG)5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)和双肾上腺皮质激素(DCX)阳性表达神经元,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马区IGF-1Rβ,PI3K,磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K),Akt,磷酸化蛋白激酶B(p-Akt),半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3),剪切后的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(cleaved Caspase-3)蛋白表达水平.结果:小鼠强迫游泳和悬尾实验结果表明,逍遥散正丁醇部位生药量9.1,40 g·kg-1均能明显缩短小鼠不动时间(P＜0.05,P＜0.01),表明其在9.1～40 g·kg-1剂量之间具有有效性.CUMS模型中,与模型组比较,逍遥散正丁醇部位(生药量20,40 g·kg-1)能明显提高小鼠糖水偏好率(P＜0.05,P＜0.01),缩短悬尾不动时间(P＜0.01)及新奇环境摄食潜伏期(P＜0.01);并逆转模型小鼠血清、海马区下调的IGF-1含量(P＜0.01),增加小鼠海马CA3区神经元尼氏小体数目(P＜0.01),促进海马DG区Brdu和DCX表达(P＜0.05,P＜0.01),下调模型小鼠海马IGF-1Rβ(P＜0.05,P＜0.01),p-PI3K/PI3K(P＜0.05,P＜0.01),p-Akt/Akt(P＜0.05),cleaved Caspase-3/Caspase-3蛋白表达水平.结论:逍遥散正丁醇部位具有与逍遥散全方相当的抗抑郁作用,可改善CUSM模型小鼠的抑郁样行为,诱导模型小鼠海马CA3区神经元合成尼氏小体,增加DG区神经元增殖、分化,促进神经发生;其作用发挥可能与抑制过度激活的IGF-1 Rβ/PI3K/Akt通路、减少神经元凋亡有关.