基于miR-34调控KLF4/VEGF传导轴探讨活血荣络方促脑梗死后血管新生的机制

目的 基于miR-34家族基因与Kruppel样因子4(Kruppel-like factor4,KLF4)/血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)传导轴的相关性探讨活血荣络方促脑梗死后血管新生的机制.方法 将SD大鼠随机分为对照组、模型组、活血荣络方(11.7 g/kg)组和丁苯酞(60 mg/kg)组,每组10只,建立大脑中动脉闭塞/再灌注(middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R)模型,连续ig药物7d.采用改良神经功能缺损评分(modified neurological severity score,mNSS)评价大鼠神经功能缺损症状;采用免疫荧光染色观察海马区CD34及皮质区VEGF表达;采用Western blotting法检测各组大鼠梗死侧脑组织中KLF4和VEGF蛋白表达情况;采用qRT-PCR法检测各组大鼠脑组织中miR-34家族基因的表达;采用Pearson相关分析探讨miR-34家族基因与mNSS、KLF4、VEGF的相关性.结果 活血荣络方能够显著改善大鼠神经功能缺损症状(P＜0.01),增加海马区CD34阳性细胞及皮质区VEGF表达(P＜0.01),增强脑组织中ⅪLF4和VEGF蛋白表达(P＜0.01),抑制miR-34家族基因miR-34a、miR-34b、miR-34cmRNA表达(P＜0.01);且mNSS与miR-34a、miR-34b、miR-34c呈高度正相关(P＜0.05);VEGF与miR-34a、miR-34b、miR-34c呈高度负相关(P＜0.05);KLF4与miR-34b呈高度负相关(P＜0.05),与miR-34c呈高度负相关(P＜0.01).结论 活血荣络方能够抑制miR-34a、miR-34b、miR-34cmRNA表达,激活KLF4/VEGF传导轴,促进脑梗死后血管新生,进而改善神经功能缺损症状.