血根碱抑制肺腺癌A549细胞生长及机制初探

目的 研究血根碱(sanguinarine,SAN)对肺腺癌A549细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 将肺腺癌A549细胞随机分为空白组、SAN不同浓度(1.25、2.5、5、10 μmol/L)组、阳性组.采用噻唑蓝[3-(4,5-dimethyl-2-thia-zolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT]法和实时无标记动态细胞分析技术(real time cellular analysis,RTCA)检测细胞增殖;采用流式细胞术检测细胞周期分布;采用Annexin V-FITC/PI双荧光染色法检测细胞凋亡;采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测增殖相关蛋白(PCNA)、周期相关蛋白(Cyclin D1、Cyclin D3、CDK4)、凋亡相关蛋白(Bax、XIAP、Survivin)表达水平.结果 MTT法和RTCA检测结果均显示,不同浓度SAN均能够抑制肺腺癌A549细胞增殖(P＜0.01).流式细胞术检测结果显示,不同浓度SAN(2.5、5 μmol/L)处理肺腺癌A549细胞24 h后,其Gl期比例显著增加(P＜0.01).AnnexinV-FITC/PI双荧光染色法结果,经SAN(2.5、5 μmol/L)处理24 h后的肺腺癌A549细胞凋亡率明显增加(P＜0.01).Western blot结果显示,经SAN干预后的肺腺癌A549细胞的增殖相关蛋白PCNA(P＜0.01)、周期相关蛋白Cyclin D1、Cyclin D3、CDK4(P＜0.01)、抗凋亡蛋白Survivin、XIAP(P＜0.05或P＜0.01)表达水平均显著降低,促凋亡蛋白Bax(P＜0.01)表达水平明显提高.结论 SAN能抑制肺腺癌A549细胞增殖,将其细胞周期阻滞于G1期,并可诱导其细胞凋亡.