双藤汤醇提取物治疗去势骨质疏松症大鼠的实验研究
China Journal of Chinese Medicine(2021)
Abstract
目的:研究双藤汤醇提取物对去势骨质疏松症大鼠的治疗作用,并初步探讨其作用机制.方法:3月龄SPF级SD雌鼠60只,随机分为假手术组、模型组、阿仑膦酸钠组(40.25 g·L-1)、双藤汤醇提取物高剂量组(161 g· L-1)、双藤汤醇提取物中剂量组(80.5 g·L-1)、双藤汤醇提取物低剂量组(40.25 g·L-1),每组10只,除假手术组外均建立去势骨质疏松症大鼠模型.建模成功后,给予相应药物2 mL进行干预,假手术组和模型组均给予等体积生理盐水,每日1次,连续给药2个月.采用双能X线骨密度诊断仪检测大鼠左侧胫骨和股骨骨密度值;ELISA法检测大鼠血清中抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)、Ⅰ型胶原交联C-末端肽(C-terminal telopeptide of type Ⅰ collagen,CTX-1)、骨钙素(bonegla protein,BGP)和Ⅰ型前胶原N端前肽(type Ⅰ procollagen propeptide,PINP)的水平;HE染色观察大鼠股骨组织形态学变化;Western blot检测大鼠股骨组织中骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)的蛋白表达水平;RT-qPCR检测OPG mRNA、RANKL mRNA、NF-κB mRNA的表达水平.结果:与假手术组比较,模型组大鼠股骨和胫骨骨密度显著降低(P<0.05),血清中BGP、PINP的水平及股骨组织中OPG mRNA与蛋白表达水平显著下降(P<0.05),血清中TRAP、CTX-1的水平及股骨组织中RANKL、NF-κB的mRNA与蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),骨组织呈严重病理改变;与模型组比较,双藤汤醇提取物给药组大鼠股骨和胫骨骨密度显著升高(P<0.05),血清中BGP、PINP的水平及股骨组织中OPG mRNA与蛋白表达水平显著升高(P<0.05),血清中TRAP、CTX-1的水平及股骨组织RANKL、NF-κB的mRNA与蛋白表达水平显著下降(P<0.05),骨组织病理改变明显改善,且呈剂量依赖性.结论:双藤汤醇提取物可提高去势骨质疏松症大鼠的骨密度,改善骨代谢和骨组织病变,其作用机制可能与上调OPG表达,抑制RANKL、NF-κB表达有关.
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